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在處理和保存方面ELISA試劑盒要考慮哪幾個方面
更新時間:2021-03-25   點擊次數(shù):1702次

ELISA試劑盒中通常有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶聯(lián)絡(luò)物,加底物。加樣時應(yīng)將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部,防止加在孔壁上部,并留心不可濺起,不可發(fā)生氣泡。加標(biāo)本通常用微量加樣器,按規(guī)矩的量參加板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,防止發(fā)作交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。
 
在處理和保存方面ELISA試劑盒要考慮以下幾個方面:
1,要注意防止呈現(xiàn)嚴(yán)峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有相似過氧化物的活性,因此,在以HRP為符號酶的ELISA試劑盒測定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡單在溫育過程中吸附于固相,從而與后邊加入的HRP底物反響顯色。
2,樣本的采集及血清別離中要注意盡量防止細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白發(fā)生分化效果;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應(yīng)酶作符號的測定辦法發(fā)生非特異性干擾。
3,血清標(biāo)本如是以無菌操作別離,則能夠在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長期保存,應(yīng)在-70℃以下。
4,冰凍保存的血清標(biāo)本須注意防止因停電等形成的重復(fù)凍融。標(biāo)本的重復(fù)凍融所發(fā)生的機械剪切力將對標(biāo)本中的蛋白等分子發(fā)生破壞效果,ELISA試劑盒從而引起假陰性成果。此外,凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)注意,不要進(jìn)行劇烈振動,重復(fù)倒置混勻即可。
5,標(biāo)本在保存中如呈現(xiàn)細(xì)菌污染所造成的的混濁或絮狀物時,應(yīng)離心沉積后取上清檢測。

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