九色腾只为高清而生,亚洲av无码国产精品麻豆天美,久久久777天天躁狠狠躁av,亚洲av综合色区无码一二三区

技術(shù)文章您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 免疫學(xué)方法(ELISA法)檢測細(xì)胞凋亡
免疫學(xué)方法(ELISA法)檢測細(xì)胞凋亡
更新時間:2011-11-17   點擊次數(shù):1892次

細(xì)胞凋亡事件發(fā)生時,會出現(xiàn)蛋白質(zhì)和核酸分子結(jié)構(gòu)的改變,形成新的表位。利用免疫學(xué)方法對這些表位進行鑒定,有助于判斷樣本中細(xì)胞凋亡事件的發(fā)生。
細(xì)胞凋亡的發(fā)生,是由于內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶的激活,這種鈣和鎂依賴性核酸酶容易進入的核小體間區(qū)解開雙鏈DNA,產(chǎn)生單/低聚核小體片段,而核小體本身由于DNA與組蛋白H1、H2A、H2B、H3和H4形成緊密復(fù)合物而不被核酸內(nèi)切酶裂解。采用雙抗體夾心酶免疫法,應(yīng)用小鼠抗DNA和抗組蛋白的單克隆抗體,與核小體片段形成夾心結(jié)構(gòu),可特異性檢測細(xì)胞溶解物中的單/低聚核小體,從而判斷細(xì)胞是否發(fā)生凋亡。

【材料與試劑】
(1) 生物素標(biāo)記的小鼠抗-組蛋白單克隆抗體;
(2) 過氧化物酶(-POD)標(biāo)記的小鼠抗DNA單克隆抗體;
(3) 鏈霉親合素包被的微孔板;
(4) DNA-組蛋白復(fù)合物,作為陽性對照;
(5) ABTS底物;
(6) 溶解緩沖液;
(7) 溫育緩沖液;
底物緩沖液;
培養(yǎng)細(xì)胞或離體細(xì)胞的裂解物(細(xì)胞裂解步驟:收集細(xì)胞,離心后,用200μl溶細(xì)胞緩沖液重新懸浮,室溫下作用30min);
培養(yǎng)細(xì)胞的上清液;
血漿(血清);
分光光度計
【操作步驟】
(1) 取樣品離心后(1000r/min, 10min),吸取20μl上清液,加入鏈霉親合素包被的培養(yǎng)板孔中;
(2) 另加入80μl免疫反應(yīng)試劑:含抗-DNA-POD、抗組蛋白-生物素及溫育緩沖液(按1:1:18混合),室溫下孵育2h(置搖床上,250r/min);
(3) 棄上清,用300μl溫育緩沖液洗滌3次,小心移去洗滌液;
(4) 加入100μl底物緩沖液,室溫下孵育至顏色變化至適合(置平板搖床上);
【結(jié)果判斷】
盡快作比色分析(10~20min內(nèi)),用底物緩沖液作空白對照,檢測波長405nm,參考波長492nm。

聚集值 = 樣品的mU(誘導(dǎo)凋亡處理的細(xì)胞) × 100
對照的mU(未經(jīng)誘導(dǎo)凋亡處理的細(xì)胞)


注:mU=吸收值(10-3)=雙孔吸收值的平均OD值-底物OD值,若樣品的吸收值超過比色測定范圍,應(yīng)適當(dāng)稀釋后再檢測。

上海通蔚生物科技有限公司

上海通蔚生物科技有限公司

地址:上海市金山區(qū)楓涇鎮(zhèn)環(huán)東一路65弄2號3463室

主營產(chǎn)品:ELISA檢測試劑盒,ELISA試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒,人ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,豚鼠ELISA試劑盒,兔ELISA試劑盒,羊ELISA試劑盒,牛ELISA試劑盒,雞ELISA試劑盒,鴨ELISA試劑盒

©2019 版權(quán)所有:上海通蔚生物科技有限公司  備案號:滬ICP備14033764號-3  總訪問量:1188248  站點地圖  技術(shù)支持:環(huán)保在線  管理登陸

亚洲国产精品一区二区久久HS| 国产二级一片内射视频播放| 亚洲精品无码MV在线观看网站| 年轻教师6电影完整版| 中文字幕在线看成电影乱码| 内射人妻少妇无码一本一道 | 太深太粗太爽太猛了视频免费观看| 久久久久免费看黄a片app| 又硬又粗进去好爽a片看| 国产成人综合色在线观看网站| jealousvue成熟50ma| japanese50mature日本亂倫| 韩国免费A级毛片久久| 综合欧美五月丁香五月| 国产精品打着电话偷着情| 久久av无码乱码a片无码波多| 老汉的性生生活1一7| 漂亮人妻被强了bd影片| 国产草草影院ccyycom| 五个丝袜女警榨精嗯啊哦哦| 嫩模超大胆大尺度人体写真| 亚洲av无码一区二区三区系列| 亚洲国产精品久久久久久| 无码毛片AAA在线| 国产精品JIZZ在线观看无码| 亚洲色欲色欲大片www无码| 国精产品一品二品国精破解| 成av人电影在线观看| 欧美亚洲人成网站在线观看| 肥臀浪妇太爽了快点再快点 | 亚洲小说春色综合另类| 狠狠综合久久AV一区二区三区| 国产精品久久久久9999高清| 中文字幕乱码人妻无码久久| 北条麻妃在线一区二区| 好男人好资源电影在线播放| 国产看黄网站又黄又爽又色| 十七岁在线观看免费高清完整版| 亚洲 自拍 另类小说综合图区| av无码免费一区二区三区| 一女被两男吃奶玩乳尖|